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如何活化ATCC菌种及其冷冻干燥管的操作

作者:标准菌株生产厂家 来源:www.fuliaozhongguo.com 发布于:2019/9/29 19:54:17 点击量:

  微生物中ATCC菌种大家有所了解吗?下面,小编就从如何活化ATCC菌种及其冷冻干燥管的操作来介绍一下它的相关知识,希望对大家有所帮助。

  如何活化ATCC菌种:

  低温保存管之临时存放及解冻

  1、低温保存管应存放于-20℃ ~ -80℃之低温条件下。

  2、准备 37℃之 70﹪(V/V)酒精浴槽只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,以免危险;若以 37℃水浴取代,应避免水中微生物污染,其中事先安放小试管架,液面不可高达管塞。

  3、将 cryotube 从低温保存条件中取出,置于 37℃浴槽之小试管架上。

  4、不断轻微摇动,液面不可高至管塞,直至结冰完全溶解。

  划线法

  1、手持金属接种环,用酒精灯将接种环烧至火红,并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分,等待约 10 秒钟,将接种环前端轻触培养基边缘凝胶,待接种环完全冷却后,以环沾黏菌滴,由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线,直到涵盖 1/3 培养基为止。

  2、灼烧接种环,待数秒冷却后,旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域。

  3、重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。

  4、灼烧接种环,将接种环归位。

  ATCC菌种冷冻干燥管的操作:

  1、以沾有70%酒精的棉花,擦拭外管,在火焰上加热外管之尖端。

  2、滴数滴无菌水于加热处,使外管破裂,再以硬棒敲破尖端。

  3、取出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。

  4、适用于细菌用无菌吸管,吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基,滴入内管内,并轻微震荡,直到均匀悬浮。适用于霉菌、酵母菌

  5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上,做划线分离培养或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒均匀涂抹,以检验菌种之纯度及活化情形,而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内,并依指定的温度培养之。

  6、某些菌种经过冷冻干燥保存后,迟滞期较长,必须等培养二倍时间后才能长出,且再经过一、二次继代培养 后才能正常生长,经过以上的努力后仍培养失败,才视为不能活化。

  以上就是小编的介绍,希望能加深大家对ATCC菌种的印象。




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